Validación de la reacción de polimerasa en cadena en tiempo real como herramienta diagnóstica en la aspergilosis asociada a COVID-19 en pacientes hospitalizados en Clínica Dávila de Santiago, Chile, durante los años 2020 y 2021

Introducción: Desde el inicio de la pandemia por COVID-19 se han registrado casos de infecciones de aspergilosis pulmonar asociada a esta infección, la cual tiene características diferentes a la aspergilosis pulmonar clásica y, por lo tanto, han significado un desafío diagnóstico. Objetivo: Validar una reacción de polimerasa en cadena (RPC) en tiempo real (sigla en inglés RT-PCR) comercial, como herramienta diagnóstica alternativa a la técnica de galactomanano (GM) en el diagnóstico de aspergilosis pulmonar asociada a COVID-19 (sigla en inglés CAPA). Pacientes y Método: Se analizaron resultados de RT-PCR de Aspergillus spp y GM en lavado bronco-alveolar (LBA) de 72 pacientes, hospitalizados por COVID-19 de Clínica Dávila entre los años 2020 y 2021. De estos pacientes, 33 presentaron CAPA. Resultados: La RT-PCR de Aspergillus y GM presentaron una correlación positiva (r = 0,6351, valor p < 0,0001). La técnica de RT-PCR presentó una sensibilidad (S), especificidad (E), valor predictor positivo (VPP) y valor predictor negativo (VPN) de 100, 44, 66 y 100%, respectivamente, mientras que en GM fueron de 64, 89, 84 y 73%, respectivamente para LBA. Al utilizar ambas técnicas en combinación se obtuvo una S, E, VPP y VPN de 100, 82, 88 y 100%, respectivamente. Conclusión: Este estudio concluyó que usar una técnica de RT-PCR de Aspergillus y GM en conjunto en LBA mejoraron los parámetros de desempeño de ambas técnicas usadas de manera individual para diagnosticar CAPA. Se requieren más estudios para evaluar el desempeño de técnicas combinadas en otros tipos de aspergilosis.

Background: Since the beginning of the COVID-19 pandemic, there have been cases of pulmonary aspergillosis infections associated with this infection, which has different characteristics from classical pulmonary aspergillosis and therefore, have been diagnostic challenges. Aim: To validate a commercial real-time PCR (RT-PCR) method as an alternative diagnostic tool to the galactomannan (GM) technique in the diagnosis of COVID-19-associated pulmonary aspergillosis (CAPA). Methods: Results of RT-PCR of Aspergillus spp and GM in broncho-alveolar lavage (BAL) of 72 patients hospitalized for COVID-19 at Clínica Dávila between 2020 and 2021 were analyzed. Of these patients, 33 presented CAPA. Results: The RT-PCR for Aspergillus and GM showed a positive correlation (r = 0.6351, p-value < 0.0001). The RT-PCR for Aspergillus technique presented a sensitivity (S), specificity (S), positive predictive value (PPV) and negative predictive value (NPV) of 100, 44, 66 and 100% respectively, while the GM technique presented 64, 89, 84 and 73%, respectively for BAL. Using both techniques in combination a S, E, PPV and NPV of 100, 82, 88 and 100% were obtained respectively. Conclusion: This study concluded that using RT-PCR and GM techniques in combination in BAL improved the performance parameters of both techniques from those used individually to diagnose CAPA. Further studies are required to evaluate the performance of combined techniques in other aspergillosis focus.

Aspergilosis invasiva: definiciones, diagnóstico y tratamiento / Invasive aspergillosis: definitions, diagnosis, and treatment

Resumen La aspergilosis invasiva (AI) es una enfermedad grave y con alta mortalidad. Existen factores de riesgo y se describen brotes intrahospitalarios relacionados con construcciones. También se des cribe una entidad relacionada con la infección por COVID-19, conocida como aspergilosis pulmonar asociada a COVID-19 (APAC). Es de vital importancia implementar un tratamiento adecuado y precoz, especialmente en pacientes inmunocomprometidos y críticamente enfermos. El diagnóstico se basa en reconocer los factores predisponentes, la clínica, la obtención de imágenes, exámenes directos, cultivos, histopatología y biomarca dores como el galactomanano. La droga de elección es el voriconazol, pero se deben conocer las alternativas terapéuticas dada la creciente presencia de aislamientos resistentes.

Abstract Invasive aspergillosis (IA) is a serious disease with high mortality. There are several risk factors and in-hospital outbreaks related with construction have been described. An entity related to COVID-19 infection, known as COVID-19 associated pulmonary aspergillosis (CAPA), has recently appeared. Early and appropriate treatment is of paramount importance, especially in immunocompromised and critically ill patients. Diagnosis is based on recognition of predisposing factors, clinical signs, imaging, direct examination, culture, histopathology, and biomarkers such as galactomannan. The drug of choice is voriconazole, but alternative therapies must be taken into account given the increasing presence of resistant isolates.

Evaluación de la prueba Aspergillus Galactomannan Ag VircliaR Monotest como alternativa a kit Platelia ™ Aspergillus EIA / Evaluation of the Aspergillus Galactomannan ag VircliaR Monotest test as an alternative to Platelia™ Aspergillus EIA kit

INTRODUCCIÓN: La prueba Aspergillus galactomannan Ag Virclia® (GM-VClia) es una técnica de galactomanano monotest, auto-matizada, basada en inmunoensayo quimioluminiscente (CLIA). OBJETIVO: Evaluar el desempeño del test de GM-VClia en muestras de suero y lavado bronquioalveolar (LBA) procesadas previamente con el kit Platelia™ Aspergillus EIA (GM-Plat). MATERIALES Y MÉTODOS: Se estudiaron 56 muestras de suero y 40 de LBA, correspondientes a un total de 59 pacientes (algunos con determinación de galactomamano en ambas muestras) con enfermedades pulmonares, hematológicas, LES, Covid-19 y tumores, entre otros. Trece pacientes tuvieron aspergilosis invasora (1 probada y 12 probables). RESULTADOS: La correlación entre ambos métodos para suero y LBA fue r = 0,8861 p < 0,0001 y r = 0,6368 p < 0,001, respectivamente. Hubo una concordancia global de 67,7% (65/96), siendo de 85,7% (48/56) en sueros y 42,5,0% (14/49) en LBA. Al subir el punto de corte en LBA por GM-VClia la concordancia aumentó a 85,7%. CONCLUSIONES: Se observó una mayor correlación y concordancia en sueros que en LBA. El kit GM-VClia presentó una mayor sensibilidad y valor predictor negativo (VPN), que el kit GM-Plat. Las desventajas de GM-VClia, la constituyen la categoría "dudoso", que dificulta la interpretación y que, con los puntos de corte actuales en LBA, la correlación con GM-Plat es menor. Las ventajas son su mayor sensibilidad, facilidad de procesamiento y una mayor rapidez en los resultados.

BACKGROUND: The Aspergillus Galactomannan Ag Virclia® (GMVClia) test is a monotest and automated galactomannan technique based on chemiluminescent immunoassay (CLIA). AIM: To evaluate the performance of the GM-VClia test in serum and bronchioalveolar lavage (BAL) samples previously processed with the Platelia ™ Aspergillus EIA kit (GM-Plat). METHODS: 56 samples of serum 40 from BAL (some of them with galactomaman determination in both samples), from patients with pulmonary diseases, hematological diseases, SLE, Covid-19 and tumors, among others, were studied. Thirteen patients had invasive aspergillosis (1 proven and 12 probable). RESULTS: The correlation between both methods for serum and BAL was r = 0.8861 p < 0.0001 and r = 0.6368 p < 0.001, respectively. There was a global concordance of 67.7% (65/96), being 85.7% (48/56) in sera and 42.5.0% (14/49) in BAL. By raising the cut-off point in LBA by GM-VClia, the agreement increased to 85.7%. CONCLUSION: A greater correlation and concordance was observed in sera than in BAL. The GM-VClia kit had a higher sensitivity and NPV than the GM-Plat kit. The disadvantages of GM-VClia are the "doubtful" category, which makes interpretation difficult and that with the current cut-off points in LBA the correlation with GM-Plat is lower. The advantages are its greater sensitivity, ease of processing and faster results.

Aspergilosis pulmonar asociada a COVID-19 en pacientes críticos: experiencia de un hospital público chileno / COVID-19-associated pulmonary aspergillosis in critically ill patients: experience of a Chilean public hospital

INTRODUCCIÓN: Se han descrito coinfecciones fúngicas por Aspergillus spp. en pacientes críticos cursando una infección por COVID-19. OBJETIVOS: Describir las características clínicas, diagnóstico, tratamiento y evolución de pacientes con síndrome de distrés respiratorio agudo con COVID-19, que cursan con aspergilosis pulmonar asociada a COVID-19 (CAPA por sus siglas en inglés) en un centro hospitalario público. Pacientes y MÉTODOS: Revisión de registros clínicos durante 12 meses en pacientes con diagnóstico de CAPA mediante cultivos de muestras respiratorias o determinación de galactomanano (GM). RESULTADOS: En 11 pacientes se diagnosticó CAPA probable (score APACHE II promedio de 11,7). Las muestras respiratorias se obtuvieron en 73% de los casos por lavado broncoalveolar y en 27% por aspirado endotraqueal. Se aisló A. fumigatus en 4 cultivos, A. niger, A. terreus y Aspergillus spp en una ocasión cada uno y los cultivos fueron negativos en 4 muestras. En 7 pacientes se realizó GM de muestras respiratorias, mediana: 3,6 (RIC: 1,71 - 4,4), en 10 pacientes se realizó GM sérica, mediana: 0,5 (RIC: 0,265 - 0,975) con 50% de ellas > 0,5. Dos pacientes mostraron hallazgos sugerentes de CAPA en la tomografía computada. Todos recibieron terapia anti-fúngica con voriconazol, con una duración promedio 14 días. Cuatro pacientes fallecieron. CONCLUSIONES: La presencia de CAPA debe ser un diagnóstico a considerar en pacientes críticos con COVID-19.

BACKGROUND: Aspergillus spp. fungal coinfections have been described in critically ill COVID-19 patients. AIM: To describe the clinical characteristics, diagnosis, treatment and evolution of patients with acute respiratory distress syndrome with COVID-19, who present with COVID-19 associated pulmonary aspergillosis (CAPA) in a single public hospital. METHODS: Retrospective review of clinical records during 12 months in patients diagnosed with CAPA by cultures of respiratory samples or determination of galactomannan (GM). RESULTS: Probable CAPA was diagnosed in 11 patients (average APACHE II score of 11.7). Respiratory samples were obtained in 73% of cases by bronchoalveolar lavage and in 27% by tracheal aspirate. A. fumigatus was isolated in 4 cultures, A. niger, A. terreus and Aspergillus spp on one occasion each and the cultures were negative in 4 samples. Respiratory sample GM was performed in 7 patients, median: 3.6 (IQR: 1.71 - 4.4). In 10 patients, serum GM was performed, median: 0.5 (IQR: 0.265 - 0.9 75) with 50% of them > 0.5. Two patients showed classic findings suggestive of CAPA on computed tomography. All received antifungal therapy with voriconazole, mean time 14 days. Four patients died. CONCLUSIONS: The presence of CAPA should be a diagnosis to be considered in critically ill COVID-19 patients.

Aspergilosis pulmonar invasora en pacientes reumatológicos: presentación de dos casos / Invasive pulmonary aspergillosis in rheumatological patients: presentation of two cases

La aspergilosis pulmonar invasora (API) es una infección causada por hongos del género Aspergillus que afecta principalmente a pacientes inmunocomprometidos y corresponde a la forma más grave de aspergilosis. Se asocia a una alta morbi-mortalidad, siendo fundamental un diagnóstico y tratamiento oportuno. Las manifestaciones clínicas son inespecíficas, por lo que un estudio adecuado es importante para el diagnóstico, principalmente en pacientes con factores de riesgo poco habituales. En la actualidad se han establecido categorías diagnósticas que consideran factores del hospedero, laboratorio micológico tradicional y biomarcadores como galactomanano. Éstos, junto a la mejor comprensión e interpretación de las imágenes tomográficas permiten ofrecer un manejo adecuado. En este artículo, se presentan dos casos clínicos de API en pacientes reumatológicos, y se discute la utilidad de los métodos diagnósticos.

Invasive pulmonary aspergillosis (IPA) is an infection caused by fungi of the genus Aspergillus that mainly affects immunocompromised patients and corresponds to the most severe form of aspergillosis. It is associated with high morbidity and mortality, and diagnosis and timely treatment are essential. Clinical manifestations are nonspecific, so an adequate study is important for diagnosis, mainly in patients with unusual risk factors. At present, diagnostic categories have been established that consider factors of the host, traditional mycological laboratory and biomarkers such as galactomannan. These, together with the better understanding and interpretation of the tomographic images, allow us to offer an adequate management. In this article, two clinical cases of API in rheumatological patients are presented, and the usefulness of the diagnostic methods is discussed.

Actualización en el diagnóstico y manejo de aspergilosis invasora en pacientes adultos / Update in the diagnostic and therapeutic approach of invasive aspergillosis in adult population

Resumen La enfermedad fúngica invasora producida por Aspergillus spp., es la infección por hongos filamentosos más frecuentemente reportada en individuos inmunocomprometidos y responsable de una muy alta mortalidad en este grupo de pacientes. En los últimos años se han logrado importantes avances, tanto en su diagnóstico como terapéuticos. Al momento actual se ha identificado una serie de factores de riesgo asociados a su desarrollo, permitiendo la categorización de pacientes en condición de alto, intermedio y bajo riesgo de aspergilosis invasora (AI); y también se han establecido criterios diagnósticos que consideran factores del hospedero, laboratorio micológico tradicional, biomarcadores como galactomanano y 1→3-β-d-glucano, junto a la mejor comprensión e interpretación de las imágenes tomográficas que han permitido consensuar las categorías diagnósticas. Esto, sumado a la incorporación de nuevos antifúngicos y estrategias terapéuticas en diferentes escenarios, ha permitido lograr una disminución de la mortalidad asociada. En este artículo se realiza una puesta al día de los aspectos epidemiológicos, los factores de riesgo, el diagnóstico, la prevención y profilaxis además del enfrentamiento terapéutico, incluyendo las estrategias de uso de terapia antifúngica empírica, precoz y dirigida, así como los aspectos más relevantes de los antifúngicos de primera elección y alternativos para el manejo actualizado de AI.

The invasive fungal disease produced by Aspergillus spp., is the infection by filamentous fungi most frequently reported among immunocompromised individuals and responsible for a very high mortality in this group of patients. In recent years, important advances have been made both from the diagnostic and therapeutic point of view. At present, a series of risk factors associated with its development have been identified, allowing the categorization of patients in high, intermediate and low risk of invasive aspergillosis (IA); and diagnostic criteria have also been established that consider factors of the host, traditional mycological laboratory, biomarkers such as galactomannan and 1→3-β-d-glucan, together with the better understanding and interpretation of the tomographic images that have allowed to reach a consensus on the diagnostic categories. This added to the incorporation of new antifungals and therapeutic strategies in different scenarios, have allowed decreasing the associated mortality. In this review, are updated the epidemiological aspects, the risk factors, the diagnosis, prevention and prophylaxis as well as the therapeutic confrontation, including strategies for the use of empirical, precocious and directed antifungal therapy, as well as the most relevant aspects of the first-choice and alternative antifungals for the IA management.

Aspergilosis invasora pulmonar en paciente con leucemia mieloide aguda en quimioterapia / Invasive pulmonary aspergillosis in patients with leukemia acute myeloid chemotherapy

Se reporta un caso clínico de un paciente masculino de 65 años, que ingresó al hospital por cuadro de 10 días de evolución, con sospecha clí- nica y de laboratorio de un síndrome mieloproliferativo. Estudiado por hematología, se confirmó Leucemia Mieloide Aguda M5. Se inició quimioterapia de inducción. El paciente evolucionó con pancitopenia, destacando neutropenia severa hasta 200 /mm3, febril y sin foco precisado. Se trató con antibióticos de amplio espectro por 10 días con buena respuesta. Cinco días después de finalizar su tratamiento antibiótico, nuevamente comenzó con fiebre, alza de parámetros inflamatorios, neutropenia severa y clínica de foco respiratorio. Se realizó Tomografía Computada (TC) de tórax y galactomanano en sangre, ambos compatibles con aspergilosis pulmonar, por lo que se inició tratamiento con voriconazol. El paciente evolucionó con buena respuesta clínica y de laboratorio, mejoría de imá- genes del TC de tórax y negativización de galactomanano. Al mes cedió la pancitopenia. Fue dado de alta en buenas condiciones generales, con indicación de volver a hospitalizar para quimioterapia de consolidación.

A report of a clinical case of a male patient aged 65 is presented. He entered to the hospital for 10 days evolution box with clinical and laboratory suspicion of a myeloproliferative syndrome. Studied by hematology, acute myeloid leukemia M5 was confirmed. induction chemotherapy began. The patient developed pancytopenia, highlighting severe neutropenia up to 200 / mm3, fever and without pointed focus. He was treated with broadspectrum antibiotics for 10 days with good response. Five days after finishing his antibiotic treatment began with fever again, rising inflammatory parameters, neutropenia and severe respiratory clinical focus. Computed Tomography (CT) of the chest and blood galactomannan was realized, both were compatible with pulmonary aspergillosis, starting treatment with voriconazole. The patient developed good both clinical and laboratory, improvement in chest CT images and negativization galactomannan response. Month later yielded pancytopenia. He was discharged in good general condition, indicating again been hospitalized for consolidation chemotherapy.